SN/T1198-2013轉基因成分檢測馬鈴薯檢測方法內容是什么?百檢網檢測范圍廣泛，可根據客戶需求選擇合適的檢測標準及項目安排檢測，全國近千家合作實驗室，CMA/CNAS資質齊全，可就近安排寄樣檢測。今天百檢網就給大家簡單介紹一下SN/T1198-2013轉基因成分檢測馬鈴薯檢測方法標準內容。

1 范圍

本標準規定了馬鈴薯及其加工產品中轉基因成分檢測的PCR方法和實時熒光PCR方法。

本標準的篩選檢測適用于馬鈴薯及其加工產品中轉基因成分的定性檢測。

本標準的鑒定檢測適用于馬鈴薯EH92-527-1實時熒光PCR的品系鑒定。

2 規范性引用文件

下列文件對于本文件的應用是必不哥少的。凡是注日期的引用友件僅注日期的版本適用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其*新版本(包括所有的修改單)適用于本文件。

GB/T 6682 分析實驗室用水規格和試驗方法

GB/T 19495.2 轉基因產品檢測 實驗室技術要求

GB/T 19495.3 轉基因產品檢測 核酸提取純化方法

GB/T 19495.7 轉基因產品檢測 抽樣和制樣方法

3 術語和定義

下列術語和定義適用于本文件。

3.1 轉基因 transgene

將物種本身不具有的來源于其他物種的功能DA序列通過生物工程技術，使其在該物種中進行表達，以便使該物種獲得新的品種特征。

3.2 內源基因 endogenous gene

在栽培的物種中拷貝數恒定的、不顯示等位基因變化的基因。該基因可用于對基因組中某一目的基因的定量分析。

3.3 外源基因 exogenous gene

利用生物工程技術轉入的其他生物基因，使該生物品種表現新的生物學性狀。

3.4 陽性目標DNA對照 positive dNa target control

參照DNA或從可溯源的標準物質提取的DNA或從含有已知序列陽性樣品(或生物)中提取的DNA。該對照用于證明測試樣品的分析結果含有目標序列。

3.5 陰性目標DNA對照 negative DNa target control

不含外源目標核酸序列的DNA片段。可使用可溯源的陰性標準物質。

3.6 提取空白對照 extraction blank control

該對照為在DNA提取過程中，以水代替測試樣品完成提取過程所有步驟，用以證明提取過程中沒

有核酸污染。

以不同批次提取的DNA并進行多個PCR分析時，在做測試樣品PCR時還應同時包括提取空白對照。

4 縮略語

下列縮略語適用于本文件。

AAD： resides outside T-dna

在轉座自大腸桿菌Tn7中編碼鏈霉素腺苷酰(基)轉移酶的基因

ArabSSUlA： arabidopsis thaliana ribulose- 1，5-bisphosphate carboxylase( Rubisco )small subunit ats lA promoter

擬南芥( Arabidopsis thaliana)的核酮糖-1，5-二磷酸羧化酶小亞基1A的啟動子

CaMv35S： promoter from cauliflower mosaic virus

花椰菜花葉病毒35S啟動子

CP4 EPSPS： 5-enolpyrulshikimate-3-phosphate synthase 5-enolpyrul shikimate-3-phosphate synthase

來源于農桿菌 Agrobacterium sp. Strain ce4的5-莽草酸-3-磷酸合成酶

cry 3A cry3a delta-endotoxin

由Bacillus thuringiensis subsp. Tenebrionis(B.T.T) strain bi256-82的蛋白。這個蛋白具有抗蟲活性，尤其是可以選擇性殺死科羅拉多馬鈴薯甲蟲( Colorado potato beetle larvae)

CTAB： hexadecyl trimethyl ammonium bromide

十六烷基三甲基溴化銨

E9 3’ the 3， non-translated region of the pea ribulose-1， 5-bisphosphate carboxylase small subunit (rbcS)E9 gene

來源于豌豆的核酮糖-1，5-二磷酸羧化酶E9基因小亞基3’端序列

EDTA： ethylene diamine tetraacetic acid

乙二胺四乙酸

FMV35S： a promoter derived from figwort mosaic virus

玄參花葉病毒35S啟動子

NOS： nopaline synthase terminator

胭脂堿合成酶3’轉錄終止子

NPT-II： neomycin phosphotransferase-II

新霉素-3’-磷酸轉移酶

oriV： resides outsideT-dna

一個源自農桿菌 Agrobacterium的RK2質粒的1.3kb的復制區域

ori332： resides outsideT-dna

一個源自pBR322質粒的1.8kb的片段，其中包含復制區域和轉移結合位點bom

PLRVrep： potato leaf roll virus replicase

馬鈴薯卷葉病毒復制酶

PVYcp： potato Y virus coat protein

馬鈴薯Y病毒外殼蛋白

Tris： 2-amino-2-(hydroxymethyl)-1， 3-propanediol

羥甲基氨基甲烷

UGPase： UDP-glucose pyrophosphorylase

尿苷二磷酸葡萄糖焦磷酸化酶

5 防污染措施

檢測過程中防止交叉污染的措施按照GB/T 19495.2 中的規定執行。

6 抽樣與制樣

6.1 抽樣

按照GB/T 19495.7 中規定的方法執行。

6.2 制樣

6.2.1 馬鈴薯塊莖、生薯條、生薯片、植株樣品的制備

對于同一個批次的馬鈴薯塊莖、生薯條、生薯片、植株樣品，把每一個樣品洗凈，在任意部位用小刀切下約1cm3的樣品，用液氮研磨成粉末制成小樣，然后將所有小樣混勻，取1g用于提取DNA。

6.2.2 馬鈴薯淀粉樣品的制備

把每包取樣的120g淀粉充分混合，從中取1g作為小樣，然后將所有小樣在一起充分混勻，取1g用于提取DNA。

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